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谢海燕，温清萍，崔剑峰
(广东省东莞市兽医防疫检疫站，广东东莞 523010)
广东省某猪场的生长舍猪群出现了一种以咳嗽、喘气、发热为主要特征的疾病。自发病之日起，生长舍存栏猪15d内已死亡了15%。经流行病学调查、临床症状和实验室诊断，最后确诊为非典型猪瘟与猪圆环病毒Ⅱ型的混合感染。采用相应的综合防治措施后，病情得到了迅速控制，效果明显。
1 发病情况
此猪场生长舍猪群体重约15kg～20 kg，15日龄时曾用猪瘟兔化弱毒疫苗2头份剂量免疫接种。本次共有发病36%，陆续死亡15%。猪场技术人员曾用磺胺、青霉素等抗菌药物治疗，但效果不明显。
2 临床症状
病猪精神委靡，被毛粗乱，皮肤苍白，有的可见豆状黑斑，高热稽留，体温41 ℃左右，食欲减退，渴欲增加，大便干硬或呈糊状。咳嗽，呼吸迫促，眼结膜潮红，病程较长的猪有的衰竭死亡，有的成为僵猪。
3 剖检变化
各肠段充血、出血，肠系膜淋巴结和腹股沟淋巴结肿大、出血，切面呈大理石样；扁桃体肿大；肾肿大、淤血，表面呈沟回状，呈土黄色，有点状出血；膀胱黏膜有较多出血点；胃黏膜有的水肿，肝脂肪变性而带黄色，肺充血、水肿、淤血。
4 实验室诊断
4．1 猪瘟直接免疫荧光抗体试验
剖检病猪，取其扁桃体、肾脏、淋巴结等组织。速冻1 min后，进行冰冻切片，厚度为6 μm，切片展贴于洁净载玻片上；经丙酮固定15 min后，用PBS缓冲液漂洗，自然风干；用猪瘟、猪细小病毒、猪病毒性腹泻的三价荧光抗体（购自中国兽药监察所）滴加于切片表面，于37 ℃下作用0.5 h后，轻漂洗，自然干燥；封固盖片，镜检。于荧光显微镜视野中，可见组织上皮细胞浆内呈现黄色、绿色或黄绿色，细胞核不着色，细胞轮廓分明，为猪瘟病毒感染阳性。
4．2 圆环病毒多重聚合酶链式反应（PCR）检测
采用农业部兽医诊断中心的圆环病毒PCR检测试剂盒。取血清，经蛋白酶、RNA酶等55 ℃消化过夜后，提取病毒模板DNA，进行多重PCR扩增，PCR结束后，取15 μL反应产物于10 g/L的琼脂糖凝胶中电泳，紫外透射仪中观察结果。结果显示，圆环病毒Ⅱ型阳性，圆环病毒Ⅰ型呈阴性。
4．3 伪狂犬病毒、致病菌的鉴别诊断
用PCR检测伪狂犬病病毒，同时将病料分别接种于普通琼脂平板、血液琼脂平板、伊红美蓝琼脂平板，进行细菌分离，结果均为阴性。
5 防制
鉴于以上流行病学调查、剖检变化和实验室诊断结果，可确诊为非典型猪瘟与猪圆环病毒Ⅱ型的混合感染。为此，采取了以下措施。
5．1 猪瘟疫苗紧急预防接种。体质强壮，健康状况良好的假定健康猪只，用猪瘟兔化弱毒疫苗10头份补防一次；对可疑病猪，可用猪瘟兔化弱毒疫苗25头份大剂量注射。
5．2 对病猪进行肌肉注射圆环病毒抗血清0.2 mL/kg，每天1次，连用3 d~5 d。
5．3 全群拌料饲喂，每吨饲料拌加康400g+磺胺五甲氧嘧啶400g+抗菌增效剂300g，连喂7 d。
5．4 分析传染来源，封锁病猪场，焚烧病死猪后深埋，进行无害化处理，僵猪淘汰，对可疑病猪就地隔离观察，凡被病猪污染的猪舍、环境、用具等使用复合醛进行彻底消毒。
经采取以上措施，病情得到了有效控制。
6 小结
6．1 近几年来，猪瘟多表现为非典型性。而且非典型猪瘟又有多种表现形式，如繁殖障碍性猪瘟、隐性猪瘟、温和性猪瘟等，在临床上往往难以确诊，这使猪瘟的防制更加复杂。采集病猪扁桃体等组织做直接免疫荧光抗体检测病毒可确诊猪瘟，此方法简单易行。
6．2 由于猪瘟目前尚无特效药物可以治疗，做好该病的综合性预防工作才是最重要的。要加强诊断和免疫监测，坚持自繁自养，有适合本地实际情况的免疫程序。免疫不合理，常易出现非典型性猪瘟。疫苗剂量不够，也易造成非典型猪瘟的发生。
6．3 猪圆环病毒Ⅱ型及其相关的疾病已在全世界范围内发生与流行，它属于一种免疫抑制性的疾病，可以降低猪的免疫应答能力。必须对该病毒保持特别的警惕，该病的存在，也可能是引起此次非典型猪瘟混合感染的原因之一。
总之，猪场应完善科学管理体系，加强饲养管理，搞好环境卫生，栏舍定期消毒，以提高猪体抗病能力，减少和切断疫病传染机会。
